原理
转化（ transformation ）是指一段同源或异源的 DNA 转入受体细胞并得到表达的水平基因的转移过程，是现代分子生物学研究和基因工程不可缺少的重要技术。
转化过程所用的受体细胞（通常是大肠杆菌），一般是限制修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变体，它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代，受体细胞经过一些特殊方法的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（即带有异源DNA分子的受体细胞）。
菌株
E.coli DH5a 菌株（感受态）
转化
- 质粒1uL加入10ul的感受态细胞中，冰上放置40min。
- 42℃水浴锅内热激90s（让质粒进入感受态细胞）。
- 取出，冰上放置5min（让感受态细胞关闭）。
- 加入200ul LB液体培养基（无抗性AMP），37℃摇床培养1h。
涂板
将上述培养液20uL涂布在含AMP的LB固体培养基上，过液培养。
挑菌
次日如果发现板子已经长有菌落，则用5uL的枪头挑一个单菌落，打入5mL的LB液体培养基中（ 实验室的氨苄为1000X的，即100mg/mL，因此5mL的液态培养基里加入5uL，即100ug/mL )，放于摇床培养，37℃过夜。（5mL LB培养基+5uL AMP + 用枪头挑菌，枪头可加入培养瓶中）
第二天提取质粒或保藏（保藏菌株放于负80冰箱）。
LB培养基的配制
下面以100mL（250mL）的LB培养基为例说明
- 胰蛋白胨(Tryptone)-1g（250mL–2.5g)
- 酵母提取物（Yeast Extract) 0.5g(250mL–1.25g)
- NaCl-1g)(250mL–2.5g)
- 琼脂(Agar) 1.5g(250mL–3.75g)
- 单蒸水：100mL(250mL–250mL)
抗性LB培养基
- 高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中；
- 待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素（实验室的氨苄为1000X的，即100mg/mL，因此5mL的液态培养基里加入5uL，即100ug/mL ），以免温度过高导致抗生素失效；
- 充分摇匀。
- 如果是固体培养基，则用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。